目 录

　　第一部分 检验前病人准备和标本采集………………… 7

　　一 检验前患者准备……………………………………… 7

　　二 检验标本采集的注意事项…………………………… 8

　　三 常规标本的采集要求………………………………… 9

　　　 血液标本的采集要求 …………………………… 9

　　　 尿液标本的采集要求 …………………………… 10

　　　 粪便标本的采集要求 …………………………… 11

　　　 脑脊液、浆膜腔液、关节腔液的采集要求………12

　　　 胃及十二指肠液的采集……………………………12

　　　 精液和前列腺液的采集……………………………13

　　　 阴道分泌物的采集…………………………………13

　　　 血气分析标本的采集………………………………13

　　四 微生物标本采集要求………………………………… 14

第一部分

检验前病人准备和标本采集

　　一 检验前患者准备

　　患者准备和标本采集是检验质量保证的重要环节之一。由于患者受到各种内在和外界的影响，可使检验结果产生或大或小的误差，为此检验前患者须作适当准备，可减少随机分析误差。

　　1. 患者状态：一般需在平静状态下采集标本。高度紧张可

　　使血红蛋白、白细胞增高;劳累或受冷等刺激也可使白细胞增高;剧烈运动也能影响许多项目的测定结果，如使血浆脂肪酸含量减少，CK、LDH、AST、ALT和GLU等测定值升高。

　　2. 饮食：多数试验要求在采血前禁食8h，血脂测定要求

　　禁食12h。采血前一天的晚餐应当避免饮酒，禁止高脂肪、高蛋白饮食;血脂检验前3天注意保持正常饮食。过度空腹，若达24h以上，某些检验结果会有异常。

　　3. 药物：药物对生化检验和细菌培养的影响较大，在采样

　　检测之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。

　　4. 体位：体位影响血液循环，进而影响细胞成分和大分子

　　物质的浓度，例如由卧位改为站位，血浆ALB、TP、酶、钙、胆红素、TC及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。故应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。

　　5. 时间：① 应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平

　　分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高，排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白在排卵时减少;生长激素于入睡后会出现短时高峰;胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血钙往往在中午出现最低值。故采血时间以在大体相同的时间为好。

　　② 注意最佳采样时间，急性心肌梗死患者检查心肌肌钙蛋白在发病后4-6h采样最好，疟原虫检查在发热时最好;病毒性感染抗体，在急性期及恢复期采取双份血清对诊断意义较大。

　　二 检验标本采集的注意事项

　　1. 选择最佳采集时间：①原则上晨起空腹时采集标本;②阳性检出率最高的时间：如细菌培养应尽可能在抗生素使用前、发热前寒战期采集标本，妊娠试验应采集晨尿等;③对诊断最有价值的时间：如OGTT。

　　2. 选择正确的采集容器：采血管分为普通管、抗凝管和促凝管三类。生化、免疫、激素类检验一般选用促凝管;细胞计数、血气分析、凝血功能检测一般选用抗凝管;细菌培养选用无菌容器送检。

　　3. 保质、保量、及时送检：白带、精液、细菌培养均要求保温;血清标本应避免溶血;所有标本均要求足量采集后，尽快送检。

　　4. 标本采集后，必须在试管或容器上贴上检验申请单条码，并应当场核对无误。

　　5. 加强与检验人员的沟通：留取24h尿液前到检验科领取防腐剂;红细胞渗透脆性试验需提前与化验室预约。

　　三 常规标本的采集要求

　　(一)血液标本的采集要求

　　1. 不同的采血法在细胞成分或化学组成上都存在不同程度的差异，因此，在采集血液标本之前，应根据临床需要，不同检验项目选择合适的采血方法、选用合适的试管、确定采血量。

　　2. 采静脉血时，止血带结扎不得超过1min。

　　3. 由于血小板极易凝集，采血者应首先采集血凝测定，其次为常规血、血沉，最后才是生化免疫。

　　4. 原则上输液期间不要采血，应杜绝在输液管内采血，杜绝在三通管、静脉留置针采血。要特别注意采血不能在输液同侧进行，因输液成分会影响检测结果，钾、葡萄糖可使所测钾、葡萄糖明显增高，或因血液稀释而致数值偏低。

　　5. 不能从血液透析器出口端采血，从透析器出口端流出的血液刚经过透析过滤，血钾、肌酐、尿素很低，与体内实际含量相差很远。

　　6. 血凝、血沉管中加血至刻度处，务必要准确，并立即颠倒充分混匀5～6次，及时送检。采血和向试管中注入动作应轻柔，尽量避免溶血。标本中不能有肉眼可见的溶血，抗凝血中不能有凝块。

　　7. 已知有传染性疾病的血液标本应单独标记出来，以加强对医护人员的保护。

　　(二)尿液标本的采集要求

　　1. 根据采集时间可分为晨尿、随意尿、空腹尿，计时尿(2h、3h、12h、24h等)，午后尿、餐后尿等。以第一次晨尿(早6点至8点尿)最佳。

　　2. 空腹尿为进餐后4h左右排尿，收集下1次的尿液供检验，主要用于了解葡萄糖代谢情况。

　　3. 计时尿不论几小时，均应于计时开始排空尿液，然后于规定时间内排尿，计时尿多用于肾功能和有形成分排出率评估，亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。

　　4. 留尿后应尽快送检，如放置时间过长，将影响细菌、葡萄糖和细胞等项目的检验。当标本不能及时送检或分析时，应置4℃冷藏保存，保存时间不得超过6小时。

　　5. 尿液标本量少于5ml拒收。

　　6. 尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、精液、前列腺液、粪便等异物。最好在留尿前清洗外阴，留取中段尿。

　　7. 24h尿蛋白定量：严格收集24h尿标本，早晨七点排空尿液，七点以后至次日七点的尿液全部收集到放有防腐剂的干净容器内(防腐剂应在第一次留尿后立即全部加入)，所有尿液充分混匀，准确量取全部尿液的总量并记录到化验单上，从中取5～10ml尿液，放入另一容器内，跟化验单一起送临检室检验。

　　(三) 粪便标本的采集要求

　　1. 粪便标本应取新鲜标本，不能混有尿液或其他杂物，盛器应清洁干燥，使用粪便常规管时，保留管内液体。

　　2. 采取标本时应挑取粘液或脓血部分。外观无异常的粪便，可在表面及内部不同部位取材。

　　3. 常规检查留取少量粪便即可，绿豆粒或花生仁大小，粪便常规管中液体需保留;如作集卵检查留取需鸡蛋大小，如孵化血吸虫毛蚴最好留全部粪便。

　　4. 采集后应尽快送检，超过2小时可因pH及消化酶等影响而使粪便中细胞成分破坏分解;检查阿米巴滋养体时注意保温。

　　5. 粪便潜血试验，应嘱患者于收集标本前3天禁食动物性食物，并禁服铁剂及维生素C，否则易出现假阳性。

　　6. 无粪便而又必须检查时，可经肛门指诊采集，灌肠或服油类泻剂的粪便因经过稀或混有油滴而不适合作检查标本。

　　(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节腔液的采集要求

　　由临床医生以无菌操作采集标本，盛于无菌试管中或其他容器中送检。第一管作细菌检查，第二管作生化和免疫学分析，第三管作常规细胞计数检查。标本采集后要立即送检，以免因标本放置时间过长使其成分发生变化，如细胞破坏、葡萄糖分解;由于脑膜炎奈瑟菌离体后极易自溶，流感嗜血杆菌及肺炎链球菌也极易死亡，故细菌培养标本送检时尤其注意保温。

　　(五) 胃及十二指肠液的采集

　　一般均在门诊或病房采集后送检。胃液分基础胃酸分泌(BAO)、最大胃酸分泌(MAO)等;十二指肠液分甲、乙、丙管，甲管来自总胆管为橙黄色，乙管来自胆囊为黄绿色，丙管来自胆道为柠檬色，细菌培养应从乙管取样接种培养。

　　(六) 精液和前列腺液的采集

　　1. 精液：采集精液前至少禁欲3天，但不超过7天。检查2次至数次的患者，两次之间的间隔应大于7天。将全部精液收集于干燥洁净的塑料容器中，并立即保温送检，不可贮于避孕套中。

　　2. 前列腺液：采集前列腺液前要禁欲3～7天。采集时病人先排尿，由临床医师以前列腺按摩法取样，取样时应弃掉第一滴。标本采集后立即送检。疑为前列腺结核、脓肿、肿瘤者禁忌前列腺按摩取样。前列腺急性感染时，原则上禁止按摩前列腺，防止按摩后细菌进入血液而导致败血症。

　　(七) 阴道分泌物的采集

　　采集前24h应禁止房事、盆浴、阴道检查及灌洗等，采集时可先用生理盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈2～3厘米处，转动并停留10～30秒取得。采集后尽快保温送检，否则影响滴虫动力，容易漏检。

　　(八) 血气分析标本的采集

　　使用肝素抗凝的注射器采集动脉血1～2ml，采血后需立即排空气泡，将针头刺入橡皮塞封闭针孔，避免接触空气。标本采集后尽快送至生化室检测，15min内测定完毕。

　　四 微生物标本采集要求

　　(一)标本收集和运送的基本原则

　　正确的采集、处理与运送临床标本对微生物的检出至关重要，收集任何标本作微生物检查时，须注意以下事项：

　　1. 采集真正病灶处的标本，且不得受到邻近区域微生物的

　　污染。例如：作咽喉溃疡的涂片与培养时，须小心地从真正溃疡处采集，不要受到口腔分泌物的污染;

　　2. 采用无菌器皿收集标本，并装于无菌容器中。标本处理

　　后，收集标本的容器立即消毒灭菌;

　　3. 收集足量的标本，以提高阳性率;

　　4. 不要直接以棉拭子运送标本，因拭子采集的标本量有

　　限，极易干燥，一些病原菌陷入棉花纤维中无法成功地接种于培养基或涂片，降低了阳性率，应将拭子装于运送培养基中;

　　5. 尽量在病人使用抗生素或伤口局部治疗之前收集标本，

　　若病人已服用抗生素，医生须将其记录于检验申请单上;

　　6. 不要在标本中添加任何防腐剂，以免干扰细菌生长;

　　7. 装标本的容器须作适当标识，包括病人姓名、病员号、

　　标本来源、采集时间及临床诊断;

　　8. 立刻将标本送至微生物实验室，不可延误，如不能及时

　　送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但一般存放不能超过24h。注明标本收集时间，使检验人员接种时能判断标本是否延误。

　　(二)各类标本储存的环境

　　(三)各类标本采集、运送及注意事项

　　● 血培养标本采集

　　1. 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者，

　　需作血液细菌培养以明确病因。

　　2. 采血时机：

　　① 应于高热、寒战初期尽快采血为最佳时机

　　于高热、寒战初期或之前采血，不宜在发热高峰时采血，因为在高热时血液中可能已没有细菌，且寒战或高热后细菌很快由血液中消失，故观察发热或寒战的发作规律，掌握最佳采血时机，对提高阳性率是一个重要的关键;

　　② 应在抗生素使用之前采血

　　在抗生素使用之前或在血中抗生素浓度低谷时采血，

　　避开抗生素高峰浓度时间，即在上午抗生素治疗之前采血，如难于避免，则使用含有抗生素吸附剂或中和剂的培养瓶。

　　3. 采血量及次数

　　① 采血量 血量与培养基量之比应为1:5～1:10。成

　　人采血量为8～10ml，儿童3～5ml，婴幼儿1～2ml。成人血培养阳性率与标本量密切相关，每增加1ml血量，阳性率可提高3.2%，但也应注意采血量过多引起假阳性;

　　② 采血次数 为获得较高的阳性率，应做到以下几

　　点：一 24h内应采集2～3份血培养(抽取1次血做多种培养基应视为1份血培养)，最好分别于不同部位采血，如左、右静脉、颈静脉;二 疑为急性细菌性心内膜炎者，应在1～2h内在3个不同部分采血，亚急性细菌性心内膜炎患者第1天应在3个不同部位采血培养，如24h为阴性，应再采集3份以上血标本;三 不明原因发热者，先抽取2～3份标本，如仍为阴性结果，应在掌握发热规律后，在体温升高之前再采血2份或以上;四 疑为导管相关性败血症患者，尽快无菌操作从导管中心或VAP膜采血，进行培养;如拔除导管，采用Maki半定量法进行培养;

　　③ 血培养种类 根据病情和需要选择需氧、厌氧、真

　　菌、L型、小儿、结核血培养瓶。在病情危重、原因不明时，可同时选择几种培养瓶，尽快得到阳性结果以获得抢救时机。

　　4. 标本采集方法

　　用1%～2%碘酊或10%碘伏于抽血局部皮肤分别作用30s或60s后，再用75%乙醇脱碘，待乙醇挥发干燥后静脉采血10ml注入血培养瓶内。

　　5. 标本运送及注意事项

　　血培养标本采集前，请提前联系细菌室。标本采集后

　　立即送至细菌室。

　　● 尿培养标本采集

　　1. 采集时间 在抗生素药物使用之前或停用抗菌药物5

　　天之后留取尿液标本;尿液在膀胱内应停留6～8小时以上，使细菌有足够的时间繁殖;

　　2. 采集方法：

　　① 中段尿采集法

　　女性：成年女性用肥皂水清洗外阴部，再用灭菌水或

　　1:1000高锰酸钾水溶液冲洗尿道口，无菌纱布擦拭，用手指将阴唇分开排尿，弃去前段尿，留取中段尿10ml左右于无菌容器中，加盖立即送检;

　　男性：翻转包皮，用肥皂水冲洗尿道口，后用清水冲洗，

　　弃去前段尿，留取中段尿10ml左右于无菌容器中，加盖立即送检;

　　② 膀胱穿刺尿采集法 当中段尿培养与病例相矛盾时，为

　　排除中段尿可能造成感染，可用耻骨上膀胱穿刺尿;

　　③ 肾盂尿采集法 充分冲洗膀胱，以最后一次冲洗尿作

　　为对照，然后用导尿管插入输尿管，分别标记左右侧，收集3次尿，此法一般由专科医生采集;

　　④ 导尿采集法 采取导尿管留尿，取10～15ml于无菌容

　　器内送检;长期留置尿管患者，应在更换新的尿管时留取标本;

　　⑤ 集尿法 尿结核分枝杆菌培养时，可取一清洁容器，

　　留取24h尿取沉渣10～15ml送检。

　　3. 标本送检 采集后，立即送检;如不能立即送检，则必

　　须保存于4～8℃冰箱，不超过6h。

　　● 痰培养标本采集

　　1. 采集时间 以晨痰为最好。对支气管扩张症或与支气管相通的空洞患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰液。最好在应用抗菌药物前采集标本。

　　2. 采集方法 患者清晨起床后，用清水反复漱口后用力自气管深处咳出第一口痰于灭菌容器内，立即送检;对于痰量较少或无痰的患者可采用雾化吸入加温至45℃的10%NaCl水溶液，使痰液易于排出;对咳痰量较少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，诱发咳痰;

　　对于一些疑难、病情危重或免疫受损患者继发肺部感染可用一些侵入性诊断技术采集下呼吸道标本，如环甲膜穿刺吸痰。

　　3. 标本运送 采集后，立即送检，以防某些细菌在外环境中死亡;做结核分枝杆菌和真菌培养的标本如不能立即送检，可放4℃保存，以免杂菌生长。

　　4. 注意事项：做结核分枝杆菌检查，痰量要多;有1/4～1/2肺部感染患者可能发生菌血症，最好同时做血培养。

　　● 眼分泌物标本采集、运送及注意事项

　　1. 标本采集

　　① 采取眼分泌物 应先用无菌生理盐水冲洗眼部，尽

　　量将外表杂菌除去，然后以无菌纱布或棉球拭干，再以无菌棉拭子采取新鲜分泌物送检。特种标本如泪囊腺液、前房液、虹膜碎片等应由眼科医生手术时采取，盛于无菌试管内;

　　②沙眼衣原体 首先刮去眼结膜表面的分泌物，然后

　　用无菌小刀刮取结膜穹及睑结膜上皮细胞，用链霉素处理后备用。

　　2. 标本运送 标本采集后立即送到实验室。

　　3. 注意事项 注意无菌操作技术;对于刚用抗生素治疗过或用抗菌消毒药物冲洗过的患者，最好在12～24h后采集标本，以避免药物的影响。

　　● 皮肤、软组织脓肿培养标本的采集、运送及注意事项

　　1. 标本采集

　　① 组织(脓肿周围或感染部位下组织)经手术或活检

　　获得的组织是皮肤和软组织感染最好的检测标本。尽可能多采集组织，如为烧伤感染定量培养则至少采集组织0.5克。

　　② 开放性脓肿 以无菌生理盐水清洁创面，尽量抽吸

　　深部脓液送检;标本量大于1ml。

　　③ 闭合性脓肿 以无菌生理盐水或70%乙醇擦去表面

　　分泌物，再抽吸脓肿壁，无菌操作置入厌氧运送系统。

　　④ 分泌物 组织或脓液标本优于分泌物。若必须采集

　　分泌物，以拭子深入伤口，取邻近新生组织处标本，置运送培养基运送。应采集两份，分别用于培养和涂片革兰染色。

　　⑤ 蜂窝组织炎 以无菌生理盐水或70%乙醇清洁局部

　　后，用注射器自炎症中央抽吸，未形成脓肿时，标本难以采集，可用小量生理盐水罐洗，注入无菌容器中。

　　⑥ 留置导管局部软组织感染 怀疑发生导管相关性感

　　染时，应采集导管做病原学检查。

　　2. 标本的运送 组织和蜂窝组织炎标本室温下15分钟

　　内，脓液拭子或厌氧运送系统室温下2小时内送达细菌室，最长不超过24小时。

　　3. 注意事项

　　① 采集伤口标本时避免皮肤感染非常重要。可通过

　　革兰染色评价伤口标本的质量，如出现上皮细胞提示标本已受皮肤污染，培养结果毫无意义;100×高倍视野中超过5个鳞状上皮细胞的伤口标本不适合做厌氧培养;

　　② 脓肿厌氧培养推荐抽吸脓液或采集组织标本;

　　③ 烧伤感染只需进行需氧培养，应对烧伤表面清洗并

　　清创，再采集烧伤组织或脓液;直接采集烧伤标本可能误导临床;

　　④ 疮和坏疽应采集活检组织或抽吸液，不应采集浅表

　　组织;气管切开术创面分泌物通常不进行厌氧培养。

　　● 穿刺液标本的采集、运送及注意事项

　　1. 标本采集 采用穿刺术采集无菌体液，胸水及腹水可抽

　　取5～10ml，心包液、关节液等采集2～5ml，将所得穿刺液盛于无菌收集瓶中，充分混匀。

　　2. 标本运送 将针筒中的穿刺液置于无菌的厌氧收集瓶

　　内或插上塞子送至实验室，立刻送检或厌氧运送系统室温下2小时内送达实验室。

　　3. 注意事项

　　①标本采集应在患者用药前，或停药1～2天后进行;

　　②采集标本时避免皮肤感染非常重要，要注意皮肤的消毒;

　　③行厌氧培养时，以下情况应拒收：标本收集时，受正常菌群污染;以棉拭子收集标本;没有利用厌氧运送培养基;运送过程暴露于空气中;标本暴露于有氧环境过久。

　　● 脑脊液标本的采集、运送及注意事项

　　1. 标本采集 在患者用药前，由医生以最严格的无菌技术

　　作腰椎穿刺，用消毒液(2%碘酒等)和75%乙醇酒精消毒穿刺点，用带针芯的针头在L3-L4、L4-L5或L5-S1椎间进行穿刺。收集脑脊液3～5ml，盛于3个无菌管中送检，然后马上将最混浊管或第2管送至实验室。

　　2. 标本运送 标本采集后立即送至实验室，收到标本后立

　　即进行处理。

　　3. 注意事项

　　①流感嗜血杆菌容易在外界环境中死亡，脑膜炎奈瑟

　　氏菌对寒冷和干燥均很敏感，在体外容易自溶，故不论是涂片镜检还是进行培养，均应及时送检;

　　② 注意保温，切不可将脑脊液置于冰箱或低温保存，

　　以免细菌死亡;

　　③ 采集标本前需特别注意腰穿部位皮肤的消毒，皮肤

　　正常菌群对标本的污染可以使培养结果假阳性，第一管标本中的脑脊液最易被皮肤寄生菌污染;

　　④送检的脑脊液量要适当，满足检测需要，每项检测最少需要标本1ml。

　　● 生殖道标本采集、运送及注意事项

　　1. 标本采集

　　① 女性 由临床医师用无菌棉拭子采集阴道、宫颈分

　　泌物。怀疑盆腔厌氧菌感染时，由医师用注射器从阴道后穹处穿刺抽取标本，立即床边接种于厌氧菌平板。

　　② 男性 翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，清水冲洗，

　　采集尿道口分泌物;采集前列腺液时，先冲洗尿道和膀胱，用手指从肛门内按摩前列腺，使前列腺液溢出。

　　2. 标本运送 以棉拭子收集的标本，可于床边直接接种于

　　适当的培养基及作直接涂片;如作淋球菌培养，于5分钟内接种于培养基中，如若不能，最好利用运送培养基。

　　3. 注意事项

　　① 因为淋球菌对低温相当敏感，所以运送培养基的温度必须达到室温，才能将拭子插入;②标本容器中不能含有防腐剂;③取自阴道、子宫颈、尿道的标本不需要厌氧培养。

　　● 活组织标本的采集、运送及注意事项

　　1. 标本采集 经手术或活检获得的组织是皮肤和软组织

　　感染最好的检测标本;尽可能多的采集组织，若有可能，剩余组织保存于-70℃，以备进一步检测;如为烧伤感染定量培养则至少采集组织0.5克。

　　2.标本运送 将组织置于厌氧系统或无菌螺旋盖容器。标本少时，加几滴无菌生理盐水保湿。室温下于15分钟内送至，胃活检组织于室温下1小时内，或4℃环境下最长不超过24小时送达实验室。

　　2. 注意事项

　　坏疽应采集活检组织标本或抽吸液，不应采集浅部组织;组织标本是非常珍贵的，要注意避免因操作不当引起污染。